告别“抑制剂”干扰:粪便病毒RNA提取的磁珠法新方案
在肠道病毒检测与科研工作中,粪便样本的核酸提取是一项公认的挑战。样本中富含的胆汁酸、多糖及复杂多酚,不仅是PCR反应的强抑制剂,更可能导致提取产物纯度不足,直接影响下游检测结果的可靠性。
针对这一场景,一款基于磁珠法的粪便病毒RNA提取试剂盒,以“有效去除抑制物”与“适配自动化”为核心设计目标,为样本前处理环节提供了新的选择。
技术路径:从样本到RNA的关键步骤
磁珠法粪便病毒RNA提取试剂盒 由超顺磁性纳米微球及高效提取试剂组成。其操作流程经过简化设计:
1.样本前处理:取20mg粪便样本,加入250μL PBS,震荡混匀后以12000g离心5分钟,取上清液。
2.消化裂解:使用20μL(20mg/mL)蛋白酶K进行处理。
3.磁珠结合与洗脱:利用表面修饰的磁珠完成核酸的吸附、洗涤与洗脱。
实验数据:4例粪便样本的验证结果
为评估产品性能,我们提取了4例不同的粪便病毒样本,并参照上述流程进行测试。以下为关键实验数据:


图源:医脉赛粪便病毒实验数据
完整性检测:通过1%琼脂糖凝胶电泳检验RNA完整性。结果显示,4例样本的RNA条带清晰完整,表明提取过程对RNA分子结构保护良好。
纯度与浓度检测:使用Nanodrop对洗脱产物进行质量评估,所获RNA的纯度和浓度均能满足后续PCR扩增及文库构建的实验要求。
下游扩增验证:经荧光定量PCR检测,4例样本均获得了有效的扩增数据,证实提取产物中无明显的PCR抑制剂残留(如胆汁酸、多糖等)。
产品特性与工艺要点
该试剂盒在工艺设计上具备以下特点:
操作安全性:配方中不含苯酚、Chloroform等有毒有机试剂,保障实验操作人员的生物安全。
样本适配性:针对粪便样本中常见的胆汁酸、多糖、复杂多酚等杂质,配方经过了专门的去抑制优化处理。
自动化兼容性:为自动化核酸提取仪进行了流程适配设计,并已具备预装板选项,有利于减少手工操作带来的批间差异。
应用定位
本试剂盒适用于粪便病毒样本RNA的提取与纯化,提取产物可直接用于荧光定量PCR、基因测序及文库构建等下游实验,适用于临床检验实验室及科研机构开展肠道病毒相关研究。
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